У нас уже 176407 рефератов, курсовых и дипломных работ
Заказать диплом, курсовую, диссертацию


Быстрый переход к готовым работам

Мнение посетителей:

Понравилось
Не понравилось





Книга жалоб
и предложений

 





Название Механизмы работы игаперона Hsp70 в нормальных клетках и при клеточной патологии
Количество страниц 155
ВУЗ МГИУ
Год сдачи 2010
Бесплатно Скачать 23005.doc 
Содержание Содержание
2 СОДЕРЖАНИЕ

1. ВВЕДЕНИЕ 5

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 7

2.1. Белки теплового шока, их индукторы и классификация. 7

2.2. Структура и свойства Hsp70 16

2.3. Молекулярные механизмы апоптоза и протективная

функция Hsp70 20

2.4. Экспрессия белков теплового шока в опухолевых клетках 29

2.5. Hsp70 и иммуногенность опухолей 31

2.6. Роль шаперонов в нейропатологиях 33

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 45

3.1. Клеточные линии и их культивирование 45

3.2. Животные 46

3.3. Белки 46

3.4. Антитела. 46

3.5. Электрофоретические методы. 47

3.6. Очистка Hsp70 для иммунизации и использования в опытах 47 по введению в клетки и/или в культуральную среду.

3.7. Иммунохимические методы 49

3.8. Конфокальная микроскопия 50

3.9. Filter Trap Assay 50

3.10. Protein Interaction Assay (PIA) 51

4. РЕЗУЛЬТАТЫ 52

4.1. Работа шаперонного аппарата клетки в процессе реакции 52 на тепловой стресс

4.2. Защитная роль Hsp70 в опухолевых клетках. 64

4.2.1. Диагностикум для определения концентрации Hsp70 в 64 биологических жидкостях.

4.2.2. Анализ экспрессии белков-шаперонов, Hsp70 и Hdj1, в 66 опухолевых клетках человека.

4.2.3. Зависимость устойчивости опухолевых клеток к индукторам апоптоза от уровня экспрессии Hsp70.

4.2.4. Вмешательство Hsp70 в сигнальные пути апоптоза, g.

подавление действия эффекторных каспаз.

94

4.2.5. Комплексы шаперона Hsp70 с членами семейства NF-kB.

4.2.6. Поверхностный белок клеток рабдомиосаркомы крыс, р58, ответственный за метастазирование в легкие, ассоциирован с юо Hsp70.

4.3.7. Введение животным препарата очищенного Hsp70

приводит к предотвращению формирования опухолевых узлов в -| 04

легких при введении опухолевых клеток.

111

4.3. Hsp70 во внеклеточном пространстве.

4.3.1. В экспорт Hsp70 вовлечены сигнальные механизмы

клетки. 111

4.3.2. Примеры интернализации белка клетками разного

118 тканевого происхождения.

124

4.3.3. Защитные свойства экзогенного Hsp70.

4.4. Hsp70 и нейродегенеративные заболевания.

4.4.1. Формирование агрегатов мутантных белков в нервных клетках приводит к их гибели

4.4.2. Hsp70, проникая в нервные клетки, подавляет процесс

128 образования агрегатов и отменяет апоптоз

4.4.3. Hsp70, введенный животным, корректирует поведение бульб- эктомированных животных (модель болезни Альцгеймера).

4.5. Защитное действие Hsp70 в моделях психо-физического

138 стресса

5. ОБСУЖДЕНИЕ 143

6. ВЫВОДЫ 152 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 155

1. ВВЕДЕНИЕ

Белок Hsp70 является индуцибельным представителем семейства белков теплового шока БТШ70 или Hsp70. HSP необходимы клетке во всех процессах ее жизнедеятельности, включая адаптацию к огромному числу цитотоксических факторов, как ксенобиотических, так и естественного происхождения. Структура Hsp70, как и других HSP, очень консервативна; достаточно отметить, что бактериальный аналог Hsp70, DnaK, по своим свойствам очень напоминает соответствующий белок млекопитающих, а их гены содержат более 50% гомологичных последовательностей.

Hsp70 - первый белок, названный шапероном. Функция шаперонов в клетке заключается в том, что они связываются с поврежденными или вновь синтезированными полипептидами и помогают им принять нативную конформацию; шапероны также участвуют в доставке белков в определенные органеллы. Шапероны способны находить в полипептидах-мишенях гидрофобные участки, которые открыты у поврежденных белков или могут открываться у нормальных, зрелых клеточных белков в момент изменения их конформации. Подобные конформационные изменения происходят, например, вследствие каскадных модификаций белков в процессе передачи клеточного сигнала. Белки семейства Hsp70 являются одними из основных элементов систем контроля за качеством белков, и участвуют в работе всех систем жизнеобеспечения клетки.

Шаперонную активность обычно связывают с защитной функцией Hsp70. To, что шаперон спасает клетки от огромного числа факторов, в том числе, вызывающих апоптоз, было подтверждено в многочисленных

опытах in vitro и in vivo с использованием широкого спектра модельных организмов, находящихся на разных ступенях эволюции.

Несмотря на огромное число исследований, посвященных различным аспектам функционирования Hsp70, нерешенным остается множество вопросов, имеющих принципиальное значение. Хотя Hsp70 и считается индуцибельным, что означает, что его экспрессия резко возрастает в ответ на стресс, в клетках человека его синтез, хотя и на невысоком уровне, происходит и в нормальных условиях. Надо отметить, что в разных тканях и клетках организма степень экспрессии Hsp70 различается. Например, она очень высока в тканях сердца, и крайне низка (и не запускается в ответ на стресс) в некоторых типах нейронов головного мозга. Уровень экспрессии Hsp70 высок в опухолях, особенно злокачественных. В связи с этим возникает ряд вопросов. Каковы последствия высокого уровня экспрессии Hsp70 в опухолевых клетках? Не ясно, каким образом нервные клетки защищаются от неблагоприятных факторов, к примеру, от формирования нерастворимых белковых агрегатов в нервных клетках головного мозга при некоторых наследственных нейродегенеративных заболеваниях, а также в клетках мозга пожилых людей.

Несколько лет тому назад появились данные о том, что Hsp70, ранее считавшийся исключительно цитоплазматическим белком, может находиться во внеклеточном пространстве, в биологических жидкостях человека. В этой связи имеет существенное значение ответ на следующие вопросы: каким образом белок может покидать клетку, какое действие он может оказать на другие клетки, находящиеся вблизи или в отдалении от клетки-донора, может ли он интернализоваться клетками-акцепторами? Цель настоящей работы была ответить на эти вопросы.
Список литературы
Цена, в рублях:

(при оплате в другой валюте, пересчет по курсу центрального банка на день оплаты)		 1425
Скачать бесплатно 23005.doc 





Найти готовую работу


ЗАКАЗАТЬ

Обратная связь:


Связаться

Доставка любой диссертации из России и Украины

Вход для партнеров

Регистрация

Восстановить доступ

Материал для курсовых и дипломных работ


Ссылки:

Выполнение и продажа диссертаций, бесплатный каталог статей и авторефератов

Счетчики:

Besucherzahler
счетчик посещений

© 2006-2022. Все права защищены.
Выполнение уникальных качественных работ - от эссе и реферата до диссертации. Заказ готовых, сдававшихся ранее работ.