У нас уже 176407 рефератов, курсовых и дипломных работ
Заказать диплом, курсовую, диссертацию


Быстрый переход к готовым работам

Мнение посетителей:

Понравилось
Не понравилось





Книга жалоб
и предложений


 






Название Биотекнологические методы интенсификации воспроизводства молочного и мясного скота
Количество страниц 234
ВУЗ МГИУ
Год сдачи 2010
Бесплатно Скачать 22940.doc 
Содержание Содержание
ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ 4

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ 7

1. ОСНОВНЫЕ МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛ ИССЛЕДОВАНИЙ 15

2. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 24

2.1. Гормональная стимуляция суперовуляции у коров-доноров 24

2.1.1. Индукция полиовуляции у коров-доноров различными гонадотропинами, усовершенствование схемы гормональной

обработки препаратом ФСГ-супер 29

2.1.2. Сополимеры поливинилового спирта как пролонгаторы действия препаратов ФСГ при индукции полиовуляции у

коров-доноров 3 5

2.1.3. Использование в качестве доноров эмбрионов коров

различного направления продуктивности 40

2.1.4. Эффективность многократного использования коров-доноров различных пород и индивидуальная изменчивость суперовуляции 47

2.2. Нехирургическое извлечение и оценка качества эмбрионов 72

2.2.1. Разработка технологических аспектов повышения эффективности извлечения эмбрионов в зависимости от

некоторых факторов 76

2.2.2. Оценка качества эмбрионов по морфологическим признакам

и резистентность ранних эмбрионов в условиях "in vitro" 89

2.3. Нехирургическая пересадка эмбрионов 98

2.3.1. Влияние различных факторов на приживляемость эмбрионов 99

2.3.2. Устройство для глубокой аппликации эмбрионов трансцервикальным путем 101

2.3.3. Эффективность межпородной пересадки эмбрионов при

получении мясных телят в молочном стаде 105

2.3.4. Получение разнояйцевых двоен путем внутрипородной и межпородной пересадки эмбрионов 108

2.3.5. Пересадка эмбрионов крупного рогатого скота как биотехнический метод борьбы с бесплодием 128

2.4. Криоконсервирование эмбрионов 132

2.4.1. Эффективность использования нового криопротектора и жизнеспособность эмбрионов в зависимости от способов крио- и деконсервации 140

2.5. Использование в условиях производства новых направлений биотехнологии 142

2.5.1. Методы регуляции соотношения полов и определения пола

ранних эмбрионов крупного рогатого скота 142

2.5.2. Соотношение пола телят при трансплантации эмбрионов

ранних стадий развития 144

2.5.3. Достоверность идентификации пола 7-суточных эмбрионов на основе анализа ДНК Y-хромосом и жизнеспособность эмбрионов

с определенным полом при криоконсервации 148

2.5.4. Спонтанное и индуцированное возникновение монозиготных

двоен 151

2.5.5. Способ и устройство для микрохирургического разделения

ранних эмбрионов при получении монозиготных близнецов 156

2.5.6. Микрохирургическая дисекция деконсервированных

эмбрионов 168

2.5.7. Эффективность получения и трансплантации свежих и деконсервированных эмбрионов крупного рогатого скота на основе экстракорпорального оплодотворения ооцитов 171

3. ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 180

ОБСУЖДЕНИЕ 190

ВЫВОДЫ 196

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ 199

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 200

ПРИЛОЖЕНИЯ 234


ВВЕДЕНИЕ

На современном этапе научно-технический прогресс в животноводстве в огромной степени зависит от разработки, освоения и реализации эффективных биотехнологических методов интенсификации воспроизводства, создания на этой основе новых высокопродуктивных пород, линий и гибридов животных. Низкие темпы воспроизводства и селекции у крупного рогатого скота, как у одноплодного вида млекопитающих, при наличии огромного генетического потенциала (число первичных фолликулов в яичниках коров составляет несколько сот тысяч), натолкнуло исследователей на поиск нетрадиционных методов повышения многоплодия. Эти методы основаны на исследованиях регуляции репродуктивной функции, совершенствовании приемов манипуляций с зародышами ранних стадий развития, половыми и соматическими клетками.

Возникновению биотехнологических направлений в разведении и селекции крупного рогатого скота предшествовал целый ряд открытий в сфере репродукции млекопитающих. Еще в конце 17-го века голландцем R.Groaf была впервые описана яйцеклетка, но лишь в 1890 г. англичанину В.Хипу из Кембриджского университета впервые в истории биологии удалось получить беременность путем пересадки 2 эмбрионов на стадии развития 2-х и 4-х бла-стомеров от крольчихи ангорской породы покрытой крольчихе бельгийской породы. В результате крольчиха-реципиент принесла 6 крольчат, из которых 4 бельгийской, а 2 ангорской пород. Успех этого эксперимента показал принципиальную возможность трансплантации эмбрионов ранних стадий развития, в том числе межпородной пересадки.

Если первые опыты носили чисто научный характер, то в 30-х годах, после обнаружения американскими исследователями Cole Н. и Hart G. [253] в крови жеребых кобыл гонадотропинов, способных вызывать полиовуляцию у самок, и разработки в 1936 г. гормонального метода повышения многоплодия животных группой исследователей ВИЖа под руководством академика Зава-довского М.М. [65, 67], трансплантации эмбрионов приобрела реальное прикладное значение.

После многочисленных опытов на лабораторных животных в 50-х годах были проведены успешные эксперименты на козах, овцах и свиньях [80, 113]. В 1940 г. группе американских исследователей [251] впервые удалось стимулировать суперовуляцию у крупного рогатого скота.

К началу 70-х годов группой кембриджских исследователей под руководством L.Rowson [410, 412, 413] в основном была разработана технология хирургической трансплантации зародышей, а первую успешную пересадку та-

ким путем осуществили в 1951 г. [488]. Там же в 1964 г. был получен первый теленок после бескровной трансплантации.

Начиная с 50-х годов в разных странах проводились многочисленные исследования по извлечению и пересадке зародышей нехирургическим методом. Однако существенное прикладное значение он приобрел лишь в середине 80-х годов. Этому способствовало создание практически новой технологии, позволяющей значительно упростить существовавшую процедуру. С этого времени трансплантация эмбрионов стала использоваться во многих странах мира в качестве одного из наиболее эффективных рычагов ускоренного воспроизводства элитного высокопродуктивного поголовья по материнской линии.

В настоящее время в США, Канаде и странах Западной Европы с развитым животноводством до 70% и более племенных быков поступают на станции искусственного осеменения с клеймом "Т" - трансплантат.

В СССР исследования в области трансплантации эмбрионов были начаты в конце 70-х годов. Первые телята после хирургической пересадки родились в 1977 г. во Всесоюзном НИИ физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных, а в 1980 г. во Всесоюзном НИИ животноводства были получены телята-близнецы после пересадки эмбрионов, хранившихся в течение двух месяцев в жидком азоте.

Широкое практическое внедрение метода началось с 1983 г., когда в стране, практически во всех союзных республиках создавались центры трансплантации эмбрионов. Если в 1979 г. было проведено лишь около 200 эм-бриопересадок, то в 1989 г. уже родилось более 3000 телят-трансплантатов.

Упадок в экономике в связи с распадом Союза самым негативным обра- зом отразился на развитии нового перспективного направления. Начиная с 1992-93 годов подавляющее большинство центров и производственных лабораторий, теперь уже в странах СНГ, было расформировано, сотни высококвалифицированных специалистов остались невостребованными. Такое положение сложилось повсеместно и практически не изменилось до настоящего времени. Тем не менее, в отдельных регионах потенциал в целом удалось сохранить, хотя и в значительно сокращенном объеме.

В Белоруссии Брестская область с 1987 г. занимает лидирующее место в области практического применения трансплантации эмбрионов. В областном центре трансплантации эмбрионов до настоящего времени проводится до 500 эмбриопересадок в год. В то же время в других 5 областях вместе взятых эта цифра не превышает 100.

Заслуживает внимания опыт селекционеров Украины, которые в период перехода к рыночной экономике, когда сельскохозяйственные предприятия из-за отсутствия валютных средств не в состоянии приобретать племенной скот за рубежом, пошли по пути преобразования стада с использованием ка-надско-американской селекции путем завоза эмбрионов и спермы голштинов

и абердин-ангусов. Возглавил эту работу Головной селекционный центр Украины (г. Переяслав-Хмельницкий), где коллектив лаборатории по трансплантации эмбрионов (под руководством биотехнологов Мадисон В.В. и Мадисон Л.В.) за год с небольшим (1993-94 гг.) произвел более 2000 эм-бриопересадок в различных регионах страны со средним уровнем стельности 54,3%- В настоящее время созданы чистопородные мясные стада во многих хозяйствах Украины.

В России на сегодня работа в области трансплантации эмбрионов практически остановлена. В то же время здесь сосредоточен огромный научный и практический потенциал. Для восстановления эффективного использования в производстве передовых биотехнологий необходима лишь реставрация уже существующего опыта. Это, в свою очередь, в значительной степени зависит от разработки наиболее оптимальных и экономически выгодных решений как в технологической цепи трансплантации эмбрионов, так и при освоении и внедрении новых биотехнологических методов определения пола, микрохирургического разделения и получения эмбрионов вне организма. Эти направления биотехнологии в последние годы приобретают все большее значение для практики и привлекают пристальное внимание ученых во всем мире.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В результате углубленных исследований в области эмбриологии млекопитающих стало возможным внедрение в практику воспроизводства сельскохозяйственных животных метода трансплантации эмбрионов, как важнейшего средства ускорения качественного улучшения и более полного использования генетических ресурсов маточного поголовья в молочном и мясном скотоводстве.

В биотехнологии ускоренного размножения высокоценных племенных животных трансплантация эмбрионов крупного рогатого скота является наиболее апробированным и широко используемым на практике методом. Подтверждением этому служат успехи в создании высокопродуктивного молочного скота в странах Северной Америки и Европы, где до 70% быков-производителей, используемых для качественного улучшения стада, получены путем пересадки зародышей. Несмотря на большое прикладное значение, потенциальные возможности трансплантации эмбрионов в практике воспроизводства используются далеко не полностью.

Среди основных причин недостаточной реализации метода - факторы экономического характера: высокая стоимость работ, низкие цены на племенной скот, ограниченные ресурсы высокопродуктивных животных. Немаловажное значение имеют и многие биологические и технологические факторы, связанные с эффективностью использования метода в условиях производства.

В технологии трансплантации эмбрионов индукция полиовуляции является звеном, от эффективности которого в большой степени зависит конечный результат. В этой области накоплен обширный материал. Но до настоящего времени вызывание суперовуляции остается нестабильным и малоизученным вопросом. Большое практическое значение имеют разработки упрощенных схем гормональной обработки, поиск надежных и эффективных веществ пролонгирующего действия.

Эффективность практического применения метода трансплантации эмбрионов существенно возрастает при использовании высокопродуктивных коров в качестве доноров эмбрионов несколько раз в год. Однако данные о влиянии на реакцию яичников и состояние матки коров многократных гормональных обработок и повторных процедур извлечения эмбрионов носят разноречивый характер.

Основным недостатком инструментов, наиболее часто используемых для пересадки эмбрионов, является определенный предел доступной глубины рога матки вследствие его кривизны. По мнению многих исследователей, при нехирургической пересадке верхушка рога матки, недоступная для катетера Кассу, является наиболее оптимальным местом [8, 12, 146, 258, 375, 405].

8

Усовершенствование инструментов для пересадки и сопутствующих технологических фрагментов могут в определенной степени повысить эффективность нехирургической пересадки.

Одним из резервов увеличения производства молока и мяса является повышение выхода телят за счет получения двоен биотехнологическими методами. Несмотря на потенциальные экономические возможности, объем исследований по получению двоен и межпородной пересадке у крупного рогатого скота недостаточен.

Существенный прогресс достигнут в области криоконсервирования эмбрионов. Несмотря на это, выживаемость эмбрионов, подвергнутых криокон-сервации, существенно снижается. Ряд вопросов, связанных с обеспечением стабильности получаемых результатов, поиск новых, менее токсичных и эффективных криофилактиков, упрощение технологии крио- и деконсервации остаются актуальными.

Внедрение и прикладное значение трансплантации эмбрионов вызвало необходимость более глубокого изучения ряда проблем, связанных с такими важными разделами молекулярной биологии и генетики, как клеточная и генетическая инженерия, которые являются основой новых направлений в биотехнологии. Одними из направлений, которые в наибольшей степени приблизились к стадии практического использования в воспроизводстве и селекции крупного рогатого скота, являются определение пола эмбрионов на предим-плантационной стадии развития, микрохирургическое разделение бластоме-ров с целью получения монозиготных близнецов и получение ранних эмбрионов на основе экстракорпорального оплодотворения ооцитов коров.

В решении проблемы определения пола достигнуты лишь незначительные успехи, что ограничивает их практическое применение. В последние годы в литературе появились сообщения об усовершенствовании метода определения пола на основе гибридизации ДНК Y-хромосом в степени, достаточной для использования в производстве, но имеющиеся данные крайне ограничены и не подтверждены исследованиями в странах СНГ.

Одним из перспективных биотехнологических приемов является проведение микрохирургических манипуляций с доимплантационными эмбрионами млекопитающих. Однако методы, используемые при микрохирургии зародышей, остаются сложными, трудоемкими, требующими специального дорогостоящего оборудования, поэтому их применение на практике ограничено. Необходимы дополнительные исследования, направленные на упрощение существующей процедуры разделения.

В последние годы огромное внимание исследователей во всем мире уделяется разработке принципиально новой биотехнологии, сочетающей использование трансплантации эмбрионов, культивирование и оплодотворение ооцитов in vitro. Решение этой проблемы позволит более интенсивно исполь-

зовать в воспроизводстве высокоценных племенных коров, резко увеличить генетический прогресс в популяции на основе повышения потенциала гамет в расчете на одну племенную корову и достоверной оценке генотипа [68]. Несмотря на существенные результаты, достигнутые в работах по получению эмбрионов in vitro, многие проблемы, в частности культивирование ооцитов и зигот, значительное снижение приживляемости развившихся эмбрионов в сравнении с эмбрионами, полученными in vivo, остаются нерешенными.

Цель и задачи исследований. С целью разработки и апробации в условиях сельскохозяйственного производства новых биотехнологических методов интенсификации воспроизводства молочного и мясного скота были поставлены следующие задачи:

- изучить эффективность различных гонадотропинов и разработать способ стимуляции суперовуляции путем пролонгирования действия гипофизар-ных гонадотропинов;

- усовершенствовать способы и разработать устройства для нехирургического извлечения и сбора эмбрионов;

- разработать устройство и усовершенствовать технику нехирургической пересадки эмбрионов;

- определить эффективность межпородной пересадки эмбрионов для ускорения воспроизводства менее распространенных пород и различных способов получения двоен;

- изучить возможность использования пересадки эмбрионов в качестве биотехнического метода борьбы с бесплодием у коров с нарушениями воспроизводительных функций;

- усовершенствовать способы замораживания-оттаивания эмбрионов на основе использования новых криофилактиков и определить влияние породных отличий на результаты криоконсервации;

- установить достоверность определения пола на основе анализа ДНК Y-хромосом и определить влияние биопсии зародышевых клеток и процессов замораживания-оттаивания на выживаемость эмбрионов с определенным полом;

- разработать способ и устройство для микрохирургического разделения эмбрионов при получении монозиготных двоен в производственных условиях, изучить возможность разделения деконсервированных эмбрионов;

- усовершенствовать метод и определить жизнеспособность свежих и деконсервированных эмбрионов, полученных в условиях in vitro.

Научная новизна. В результате многолетних исследований на большом фактическом материале теоретически обоснованы, разработаны и апробированы в условиях производства новые биотехнологические методы интенсификации воспроизводства крупного рогатого скота различного направления продуктивности.

10

Разработан способ гормональной стимуляции суперовуляции путем пролонгирования действия препаратов ФСГ (приоритетная справка на выдачу патента на изобретение по заявке № а20020647 от 23.07.2002 г., опубл. 30.03.2003 г., бюл. № 1), устройства для нерургического извлечения (патент № 1792327) и сбора эмбрионов (а.с. № 1704775). В целях повышения прижив-ляемости эмбрионов и упрощения техники пересадки сконструирован телескопический катетер для глубокой аппликации эмбрионов (а.с.№ 1796171).

Доказано отсутствие отрицательного влияния породных отличий эмбрионов при межпородных пересадках на 5 породах крупного рогатого скота и высокая эффективность различных способов получения двоен. Показана возможность сокращения бесплодия высокопродуктивных коров с нарушениями воспроизводительных функций путем пересадки эмбрионов.

Повышена эффективность криоконсервации эмбрионов на основе при- менения нового криопротектора дисахарида трегалозы. Установлено влияние породных отличий эмбрионов на результаты криоконсервации.

Установлена высокая степень достоверности определения пола ранних эмбрионов методом, основанным на анализе ДНК Y-хромосом. Доказано незначительное влияние микробиопсии зародышевых клеток и процессов замораживания-оттаивания на жизнеспособность эмбрионов с определенным полом. Отмечено увеличение частоты рождения монозиготных двоен после пересадки деконсервированных эмбрионов с определенным полом (9,4%), связанное с фактором самопроизвольного разделения эмбрионов в процессе эмбриогенеза, что представляет большой практический интерес.

Разработан упрощенный способ микрохирургического разделения эм- брионов в условиях производства и специальное устройство для его реализации (а.с. № 1727819). Доказана возможность эффективного разделения деконсервированных эмбрионов.

Разработано устройство для культивирования ооцитов и эмбрионов крупного рогатого скота (патент № 1822341).

Усовершенствован метод и определена эффективность трансплантации свежих и деконсервированных эмбрионов коров, полученных на основе экстракорпорального оплодотворения ооцитов.

Практическая значимость работы. Теоретически и практически обоснованные разработки новых биотехнологических методов позволяют оптимизировать их широкое и эффективное использование в интенсификации воспроизводства молочного и мясного скота.

Разработанный способ гормональной стимуляции полиовуляции путем однократного введения ФСГ с пролонгатором позволяет отказаться от трудоемкой 8-10-кратной обработки животных при повышении выхода качественных эмбрионов на 7,5-15,2%. Способ нехирургического извлечения эмбрионов обеспечивает эффективность извлечения до 79,5%, что превышает аналогич-

11

ные показатели при извлечении известными методами на 6,7 и 7,7% соответственно. Устройство для извлечения повышает выход эмбрионов на 13% по сравнению с использованием катетера "Нойштадт". Устройство для фильтрации эмбрионов исключает их потери, в 2-3 раза сокращает трудоемкость процесса поиска и время нахождения эмбрионов вне организма.

При нехирургической аппликации эмбрионов в верхушку рога матки с помощью разработанного устройства приживляемость свежих и деконсерви-рованных эмбрионов повышается на 19,3 и 13,8% соответственно.

Межпородная пересадка эмбрионов, изученная на 5 породах, обеспечивает средний уровень стельности 55,6%, в том числе при пересадке свежих эмбрионов 62,1%, деконсервированных - 50,4%, что не уступает внутрипо-родной пересадке и дает реальную возможность ускоренного размножения редких и ценных пород скота, а также повышения мясной продуктивности молочного стада без увеличения поголовья коров.

Пересадка ранних эмбрионов может быть предложена как биотехнический метод борьбы с бесплодием высокопродуктивных коров - стельность от пересадки деконсервированных эмбрионов составляет 33,3%.

При использовании нового криопротектора дисахарида трегалозы приживляемость деконсервированных эмбрионов повышается до 54,3%, что сравнимо с пересадкой свежеполученных эмбрионов (56%).

При пересадке эмбрионов на стадии морулы бычков рождается на 9,2% больше, чем при пересадке бластоцист, что установлено и теоретически обосновано в результате аналитического исследования.

Установлен высокий уровень достоверности определения пола ранних эмбрионов на основе анализа ДНК Y-хромосом (93,8%); доказано, что отрицательное влияние микробиопсии зародышевых клеток и процессов замораживания-оттаивания на жизнеспособность эмбрионов с определенным полом минимально (9,3%) и метод с высокой эффективностью может быть использован в производстве в условиях специально оснащенной лаборатории.

Предлагаемый способ и разработанное устройство для микрохирургического разделения эмбрионов позволяют проводить дисекцию в условиях производства без применения специального оборудования при 50%-й прижив-ляемости демиэмбрионов, что позволяет получать одного теленка на каждый использованный эмбрион (100% эффективности использования эмбрио-материала).

При получении эмбрионов in vitro использование разработанного устройства для культивирования позволило повысить уровень дробления зигот и выход эмбрионов до 54,8 и 33% соответственно, по сравнению с применением эксикатора (23,1 и 10,5%). В технологии получения эмбрионов крупного рогатого скота путем оплодотворения in vitro достигнут уровень созревания ооци-тов до стадии оплодотворения 43,4% и выход биологически полноценных эм-

12

брионов на стадии развития морула-бластоциста до 33% с приживляемостью 34,0-50,0% при пересадке свежих и 33,3-39,1% после замораживания-оттаивания.

Впервые сравнительные научные исследования проведены на 6 породах крупного рогатого скота различного направления продуктивности, в ходе экспериментов получено более 1300 телят-трансплантатов 6 пород, в том числе 277 двоен, 56 телят после пересадки половин разделенных эмбрионов, из них 11 пар монозиготных близнецов, 35 телят с определенным полом и 46 телят после пересадки эмбрионов, полученных in vitro. Созданы стада и группы высокопродуктивного черно-пестрого, абердин-ангусского, симментальского, герефордского и лимузинского скота. На республиканский элевер поставлено более 200 генетически ценных бычков-трансплантатов 6 пород, полученных биотехнологическим путем, для использования в широкомасштабной селекции.

В 1987 г. по разработанному нами проекту был создан Брестский областной центр трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота (приказ Брестского областного агропромышленного Комитета № 358 от 7.12.1987 г.).

Научная новизна и практическая значимость исследований подтверждены 3 авторскими свидетельствами, 2 патентами на изобретения и 3 рационализаторскими предложениями. Получена приоритетная справка на получение патента на изобретение пролонгирования действия ФСГ.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на:

- заседаниях Ученого совета Брестской областной государственной с.-х. опытной станции. Пружаны (1988-1992 гг.);

- республиканской научной конференции "Интенсификация производства в отраслях агропромышленного комплекса на основе использования методов биотехнологии". Минск, 1989 г.;

- республиканском научно-методическом совещании "Трансплантация эмбрионов крупного рогатого скота". Жодино, 1989 г.;

- республиканской научно-практической конференции "Биотехнология и воспроизводство в животноводстве". Горки, 1991;

- расширенном заседании Ученого совета Брестской ГОСХОС. Пружаны, 1993 г.;

- расширенном заседании отдела биотехнологии БелНИИЖ. Жодино, 1993 г.;

- межгосударственной научно-практической конференции "Генетико- селекционные и технологические проблемы разведения сельскохозяйственных животных". Киев, 1994 г.;

- 2 межгосударственной научно-практической конференции "Селекционно-генетические и биотехнологические проблемы разведения крупного рогатого скота". Брест, 1995 г.;

13

- международной конференции "Научные основы интенсивного развития животноводства". Горки, 1995 г.;

- международной научно-практической конференции "Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства". Горки, 1996 г.;

- межгосударственной научно-практической конференции "Новые методы селекции и разведения высокопродуктивных пород и типов животных". Киев, 1996 г.

- международной научно-практической конференции "Использование трансплантации эмбрионов в селекции и разведении сельскохозяйственных животных". Аскания-Нова, 1997 г.;

- международной научно-производственной конференции "Конкурент-носпособное производство продукции животноводства в республике Беларусь". Жодино, 1998 г.;

- международной научно-практической конференции "Сельскохозяйственная биотехнология". Горки, 1998 г.;

- 2 международная научно-практическая конференция "Сельскохозяйственная биотехнология". Горки, 2001 г.;

- международной научно-производственной конференции "Интенсификация производства продуктов животноводства". Жодино, 2002 г.;

- заседании научной конференции международного общественного объединения "Восток-Запад". Минск, 2003 г.

Реализация результатов исследований. Исследования проведены в 1986-2003 гг. в рамках республиканских научных программ: "Межотраслевая комплексная республиканская программа по приоритетным направлениям развития агропромышленного комплекса" (ВКГОКП № госрегистрации 01.8601311552), "Трансплантация эмбрионов в животноводстве Республики Беларусь на 1993-2000 гг." (ВКГОКП № 1997482); областных программ по развитию животноводства в период с 1990 по 2003 гг.

Основные положения и практические предложения использованы при подготовке 4 методических рекомендаций.

Результаты научных исследований внедрены и используются в лаборатории по трансплантации эмбрионов РСУП "Брестплемпредприятие", гос-племзаводах и племхозяйствах "Луч", "Дружба", "Мухавец", "Видомля", "За-козельский", колхозах "Советская Белоруссия", "Молодово", "Октябрь", "Красная звезда" Брестской области, СПК "Агрокомбинат "Снов" и УП "Аг-рокомбинат "Ждановичи" Минской области.

За работу "Внедрение и практическое использование биотехнологии трансплантации эмбрионов в племенном скотоводстве" в 1987 г. присуждена премия МК ВЛКСМ, МОС НТО и МОС ВОИР в области науки, техники, производства и педагогической деятельности.

14

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- суперовуляция и эмбриопродуктивность у коров-доноров различных пород;

- стимуляция суперовуляции у коров-доноров одной инъекцией препаратов ФСГ с пролонгатором;

- эффективность длительного использования в качестве доноров эмбрионов коров различного направления продуктивности;

- разработка технологических аспектов повышения эффективности нехирургического извлечения эмбрионов;

- зависимость приживляемости от места аппликации эмбриона в роге матки и специальное устройство для трансцервикальной пересадки;

- межпородная пересадка и получение двоен;

- использование пересадки эмбрионов, как биотехнического метода борьбы с бесплодием высокопродуктивных коров;

- влияние криопротектора и породных отличий эмбрионов на их жизнеспособность после деконсервировации;

- достоверность определение пола на основе анализа ДНК Y-хромосом;

- разработка метода разделения эмбрионов при получении монозиготных близнецов в применении к условиям производства;

- жизнеспособность свежих и деконсервированных эмбрионов, полученных путем экстракорпорального оплодотворения ооцитов коров.

Опубликованность результатов. По материалам диссертации опубликовано 48 научных работ, из них 3 авторских свидетельства, 2 патента на изобретения и 1 рекомендация. Материалы научных исследований были использованы при разработке 4 методических рекомендаций: "Технология трансплантации эмбрионов в молочном и мясном скотоводстве" (Жодино, 1996, 34 с); "Криоконсервирование эмбрионов крупного рогатого скота" (Жодино, 1997, 19 с); "Биотехнология воспроизводства крупного рогатого скота на основе оплодотворения ооцитов коров вне организма (in vitro)" (Жодино, 1999, 15 с); "Технология получения эмбрионов крупного рогатого скота вне организма (in vitro) и долговременного их хранения" (Жодино, 2001, 17 с).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 234 страницах, состоит из введения, общей характеристики работы, основных методов и результатов собственных исследований с обзором литературы, заключения, предложений производству, списка использованной литературы и приложений. Содержит 55 таблиц и 49 рисунков. Список литературы включает 494 источника, из которых 282 иностранных.

Список литературы
Цена, в рублях:

(при оплате в другой валюте, пересчет по курсу центрального банка на день оплаты)
1425
Скачать бесплатно 22940.doc 





Найти готовую работу


ЗАКАЗАТЬ

Обратная связь:


Связаться

Доставка любой диссертации из России и Украины



Ссылки:

Выполнение и продажа диссертаций, бесплатный каталог статей и авторефератов

Счетчики:

Besucherzahler
счетчик посещений

© 2006-2022. Все права защищены.
Выполнение уникальных качественных работ - от эссе и реферата до диссертации. Заказ готовых, сдававшихся ранее работ.