У нас уже 176407 рефератов, курсовых и дипломных работ
Заказать диплом, курсовую, диссертацию


Быстрый переход к готовым работам

Мнение посетителей:

Понравилось
Не понравилось





Книга жалоб
и предложений

 





Название Почва как возможная среда обитания фитопатозеннык микоплазм
Количество страниц 119
ВУЗ МГИУ
Год сдачи 2010
Бесплатно Скачать 23157.doc 
Содержание Содержание
ВВЕДЕНИЕ 4 ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. УЛЬТРАФОРМЫ И НЕКУЛЬТИВИРУЕМЫЕ ФОРМЫ БАКТЕРИЙ 8

1.1.1. Ультраформы бактерий 8

1.1.2. Некультивируемые формы бактерий 14

1.2. СИСТЕМАТИКА МИКОПЛАЗМ 17

1.3. БИОЛОГИЯ МИКОПЛАЗМ 22

1.3.1. Морфология и ультраструктура микоплазм 22

1.3.2. Физиологические особенности микоплазм 27

1.3.3. Распространение микоплазм в природе 3 О

1.4. МИКОПЛАЗМЫ - ПАТОГЕНЫ РАСТЕНИЙ 34

1.4.1. Распространение микоплазмозов растений 34

1.4.2. Пути передачи инфекции и её сохранение 39 1.4.3.Микоплазмоподобные организмы (МПО) и связь их с фитоплазмами 44

1.5. ПОЧВА КАК СРЕДА ОБИТАНИЯ ПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ 50

1.5.1. Почва - универсальная среда обитания микроорганизмов 50

1.5.2. Фитопатогеные бактерии в почве 56

1.5.3. Патогенные бактерии в почве 58

1.6. МЕТОДЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКОПЛАЗМ 61

1.6.1. Микробиологический метод 61

1.6.2. Серологические методы 61

1.6.3. Молекулярно-биологические методы 62

1.6.4. Методы микроскопирования 65

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 66

2.1. Объекты исследования 66

2.2. Методы исследования 67

2.3. Проведение лабораторных опытов 72 ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 80

3.1. Методические приемы работы с микоплазмами. 80

3.1.1. Разработка эффективных селективных методов для выделения Acholeplasma laidlawii из почвы 80

3.1.2. Десорбция Acholeplasma laidlawii из почвы 91

3.1.3. Метод ПЦР для детекции Acholeplasma laidlawii

в почве 96

3.2. Динамика численности и идентификация Acholeplasma laidlawii в почве 100

3.3. Влияние температуры и кислотности почвы на динамику численности Acholeplasma laidlawii 106

3.4. Влияние растений гороха посевного на длительность выживания Acholeplasma laidlawii в почве 108

3.5. Проникновение Acholeplasma laidlawii через корневую систему в растение гороха 110

3.6. Проникновение Acholeplasma laidlawii через корневую систему в растение томата 112

ВЫВОДЫ 117

СПИСОК ЛИТЕРАТУРНЫХ ИСТОЧНИКОВ 119

ВВЕДЕНИЕ

Микоплазмы - простейшие лишенные клеточной стенки прокариоты, объединённые в класс Mollicutes. Малый размер генома и ограниченные биосинтетические возможности обусловили их сосуществование с клетками высших эукариот. Все известные микоплазмы, встречающиеся в природе относят к симбионтам животных, насекомых и растений. Фитопатогенные микоплазмы являются возбудителями более 600 заболеваний растений из 96 семейств (Борхсениус и др., 2002). Микоплазмозы растений широко распространены в регионах интенсивного возделывания

сельскохозяйственных культур (Волгоградской, Саратовской, Астраханской областях, Краснодарском крае, на Северном Кавказе) и наносят огромный ущерб сельскому хозяйству России, снижая урожай пшеницы на 80-90%, картофеля - на 18-20%, томатов и других пасленовых на 25-38% (Власов и др., 1985,2000; Скрипаль, 1988; Борхсениус и др., 1989; Самсонова, 2000).

Основную роль в распространении микоплазмозов растений отводят насекомым-переносчикам (Власов и др., 1985; Богоутдинов, 2001). Заболевание может передаваться также через паразитические растения, например, повилику (Яковлева, 1992). Накопителем и источником инфекции являются многолетние растения, поскольку в их корнях микоплазмы способны перезимовывать, а весной мигрировать в вегетативные органы. Фитоплазмы сохраняются зимой в многолетних сорняках, клубнях, корнеплодах, луковицах (Дементьева, 1987; Seemuller et al., 1998a; Приходько, 1999; Davies, 2000). В последние годы (Мидянник, 1995; Чернов и др., 1999) экспериментально в условиях in vitro подтверждена возможность проникновения микоплазмы Acholeplasma laidlawii через неповрежденную корневую систему люцерны и гороха в надземную часть растений. Этот факт позволяет предположить существование совершенно иного механизма передачи инфекции - через корневую систему непосредственно из почвы,

которая может играть роль естественного резервуара фитопатогенных микоплазм.

Проведение экологических исследований микоплазм, изучение возможности их обитания в почве и механизмов инфицирования растений своевременно, так как позволит разработать эффективные меры предотвращения заболеваний растений и решить проблемы управления микоплазменными инфекциями.

Цель работы - выяснить пригодность почвы как среды обитания фитопатогенных микоплазм, изучить динамику численности интродуцированной популяции микоплазм в почве и возможность проникновения микоплазм из почвы в растение через корневую систему.

Задачи исследования:

• Разработка эффективных селективных методов выявления и количественного учета микоплазм в почве.

• Применение метода ПЦР для идентификации микоплазм в черноземной почве.

• Определение динамики численности интродуцированной популяции микоплазм в почве.

• Изучение влияния абиотических и биотических факторов среды на численность интродуцированной популяции Acholeplasma laidlawii в почве.

• Изучение возможности проникновения микоплазм из почвы в растение через корневую систему.

Научная новизна. Разработаны и впервые применены селективные приемы выделения микоплазм из почвы, заключающиеся в механической предварительной обработке почвы, использовании селективной среды и

повышенной температуры инкубации посевов. Впервые экспериментально установлено, что почва может играть роль естественного резервуара и источника фитопатогенных микоплазм. Длительность выживания микоплазм в почве зависит от типа почвы. Показано, что Acholeplasma laidlawii способна проникать непосредственно из почвы в растения через корневую систему, мигрировать в надземные ткани растения и длительно персистировать в них, вызывая специфические морфологические изменения растений.

Практическая значимость. В результате проделанной работы разработаны методические подходы для выявления и количественного учета микоплазм в почве. Использованы метод посева на селективную питательную среду и ПЦР-анализ. Установлено, что для проведения ПЦР в черноземной почве целесообразно использовать непрямой способ выделения ДНК, так как при непосредственном экстрагировании ДНК из почвы происходит ингибирование полимеразной цепной реакции. Рекомендованные методы могут быть использованы в экологических исследованиях микоплазм в почве, что пополнит наши знания об этой малоизученной группе микроорганизмов, а также о биоразнообразии почв; в сельском хозяйстве для диагностики возбудителей болезней растений при разработке мер борьбы с микоплазмозами и предотвращения эпифитотий.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены на 11-м Международном конгрессе по молекулярным взаимодействиям между растениями и микроорганизмами (Санкт-Петербург, 2003); конференции молодых ученых и специалистов МСХА (Москва, 2003); научной конференции МСХА (Москва, 2004).

Публикации. Материалы диссертации изложены в 4 печатных работах.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 139 страницах машинописного текста и включает в себя следующие разделы: введение, обзор литературы, описание объектов и методов исследования, результаты и обсуждение, выводы и список литературы, включающий 213 наименования, в том числе 107 - зарубежных авторов. В работе представлено 4 таблицы, 30 рисунков.

Автор выражает искреннюю признательность и благодарность научному руководителю к.б.н. А.А. Ваньковой, д.б.н. Л.В. Васильевой (ИНМИ РАН), д.б.н. проф. Шильниковой В.К., к.б.н. П.И. Иванову, д.б.н. И.В. Раковской (НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН), д.б.н. В.М. Чернову, к.б.н. Ю.В. Гоголеву и н.с. Н.Е. Мухаметшиной (КИББ КНЦ РАН, лаборатория молекулярных основ патогенеза), к.б.н. Г.И. Карлову (лаборатория биотехнологии МСХА), а также аспирантам и сотрудникам кафедр биотехнологии и микробиологии за помощь и ценные консультации при выполнении работы.
Список литературы
Цена, в рублях:

(при оплате в другой валюте, пересчет по курсу центрального банка на день оплаты)		 1425
Скачать бесплатно 23157.doc 





Найти готовую работу


ЗАКАЗАТЬ

Обратная связь:


Связаться

Доставка любой диссертации из России и Украины

Вход для партнеров

Регистрация

Восстановить доступ

Материал для курсовых и дипломных работ


Ссылки:

Выполнение и продажа диссертаций, бесплатный каталог статей и авторефератов

Счетчики:

Besucherzahler
счетчик посещений

© 2006-2022. Все права защищены.
Выполнение уникальных качественных работ - от эссе и реферата до диссертации. Заказ готовых, сдававшихся ранее работ.