Бесплатно скачать, заказать диплом, курсовую, диссертацию Особенности эпизоотологии и Биологический свойств изолятов возбудителя сибирской язвы в Алтайском крае

У нас уже 176407 рефератов, курсовых и дипломных работ

Быстрый переход к готовым работам

Мнение посетителей:

Книга жалоб
и предложений

Название	Особенности эпизоотологии и Биологический свойств изолятов возбудителя сибирской язвы в Алтайском крае

Количество страниц	146

ВУЗ	МГИУ

Год сдачи	2010

Бесплатно Скачать	24396.doc

Содержание	Содержание СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ...4 ВВЕДЕНИЕ...6 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ...11 1.1. Фенотипические и генетические свойства В. anthracis и их изменчивость...11 1.2. Эпизоотологические особенности проявления сибирской язвы у разных видов животных...19 1.3.Профилактика сибирской язвы животных...32 1.4. Заключение по обзору литературы...35 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ...40 2. Материалы и методы исследований...40 3. Результаты исследований...48 3.1. Эколого-эпизоотологические аспекты сибирской язвы в Алтайском крае...;...48 3.2. Анализ эпизоотической ситуации по сибирской язве сельскохозяйственных животных в различных природно-географических областях Алтайского края...53 3.2.1. Пораженность отдельных видов сельскохозяйственных животных...53 3.2.2. Удельная доля болезни...56 3.2.3. Динамика неблагополучных пунктов и числа заболевших животных...58 3.2.4. Сезонность болезни...61 3.2.5. Заболеваемость, смертность, летальность...62 3.2.6. Индекс эпизоотичности...68 3.2.7. Коэффициент очаговости и уровень вакцинации...70 3.3. Эпизоотологическое районирование сибирской язвы...79 3.4. Кадастр неблагополучных пунктов по сибирской язве животных...81 3 3.5. Эпизоотологическая классификация неблагополучных пунктов по сибирской язве Алтайского края...86 3.6. Эпидемиология сибирской язвы в Алтайском крае...90 3.7. Эпизоотолого-эпидемиологические аспекты сибирской язвы в Алтайском крае...92 3.8. Изучение биологических свойств изолятов В. anthracis, выделенных в различных природно-географических областях Алтайского края...94 3.8.1. Изучение фенотипических свойств изолятов В. anthracis с использованием общепринятых лабораторных тестов...95 3.8.2. Изучение фенотипических свойств изолятов В. anthracis с использованием дополнительных лабораторных тестов...98 3.9. Генетическая характеристика изолятов В. anthracis, выделенных в раз личных природно-географических областях Алтайского края...103 3.9.1. Выявление нуклеотидной последовательности генов капсуло- и токсинообразования методом ПЦР...103 3.9.2. Исследование геномного полиморфизма изолятов В. anthracis методом RAPD-fingerprinting...105 3.10. Профилактика сибирской язвы в Алтайском крае...110 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ...112 ВЫВОДЫ...128 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ...131 БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК...132 ПРИЛОЖЕНИЯ...149 Введение СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ АХ ВНИИВВиМ ДНК КОЕ мг мкг мкл мкм мл мМ МПА МПБ МЭБ нг ПААГ пкм п.н. ПЦР РНК СВК ЭДТА AR-RAPD- fingerprint ASE dNTP агар Хоттингера Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии дезоксирибонуклеиновая кислота колониеобразующие единицы миллиграмм микрограмм микролитр микрометр миллилитр миллимоль мясо-пептонный агар мясо-пептонный бульон Международное эпизоотическое бюро нанограмм полиакриламидный гель пикомоль пар нуклеотидов полимеразная цепная реакция рибонуклеиновая кислота среда для выделения и культивирования сибиреязвенного микроба этилендиамин тетраацетат Arbitrary Primers-Randomly Polymorphic DNA - амплификация случайных фрагментов ДНК консервирующий и дефибринирующий раствор Алсивера дезоксинуклеозидтрифосфат 5 Сар способность штаммами синтезировать капсульный полипеп- тид CR способность штаммами сорбировать конго красный из среды Fah способность штаммами лизироваться бактериофагами Н1у гемолитическая активность В. anthracis а-, Р-Н1у способность штаммами синтезировать различные типы гемо- лизинов Lee лецитиназная активность LD5o доза, вызывающая гибель 50% зараженных животных LDjoo доза, от которой погибают все зараженные животные рН водородно-ионный показатель среды Pho фосфатазная активность возбудителя Pit протеолитическая активность возбудителя R-форма матовые шероховатые колонии RR-форма переходная R-форма SDS додецилсульфат натрия SM - форма блестящие слизистые колонии SSR Simple sequence repeats - простые повторы Ydp способность штаммами синтезировать протокатекуевую ки- слоту 6 ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы. Сибирская язва (anthrax) является особо опасной сапрозоонозной инфекцией, встречающейся в настоящее время в виде спорадических случаев и редко в виде вспышек. Возбудитель сибирской язвы, активно распространяясь в абиотической среде, представляет потенциальную опасность для диких и сельскохозяйственных животных, а также человека. Несмотря на значительное снижение в последние десятилетия экономического ущерба от этого инфекционного заболевания в результате проведения широкомасштабных профилактических мероприятий болезнь продолжает регистрироваться во многих странах мира, в различных регионах России и в частности в Алтайском крае. Решение проблемы ликвидации сибирской язвы во многом зависит от знания экологии возбудителя с учётом влияния на него различных факторов внешней среды, закономерностей распространения, особенностей эпизоотического проявления болезни. Наиболее широко эпизоотолого-эпидемиологические особенности сибирской язвы изучены на территории бывших союзных республик и в европейской части России (Шляхов Э.Н., 1963; Андроников А.В., 1968; Данилова К.С., 1971; Погребняк Л.И., 1974; Адилов Д.А., 1977; Жанузаков Н. Ж., 1978; Завируха А.И., 1979), в Западной Сибири (Джупина СИ., 1971; Коган И.Я., 1971), Бурятии (Найманов И.Л., 1971), Кемеровской (Аркатовский П.А., 1974) и Новосибирской (Шатько П.Д., 1971) областях. Проводимая специфическая профилактика лишь предупреждает заражение животных не исключая возможности возникновения болезни. Это связано со способностью спор возбудителя длительно сохраняться в почве, обуславливая устойчивое поддержание исходного почвенного очага, стационарность заболевания и его распространение (Черкасский Б.Л., 2002). Поэтому требуется детальный анализ эпизоотических очагов, изучение их территори- 7 ального распределения и региональных особенностей проявления эпизоотического процесса за многолетний период. Существование наряду с типичными представителями вида В. anthracis, множества атипичных форм, отличающихся по фенотипическим и генетическим признакам, является свидетельством высокой пластичности генома возбудителя сибирской язвы и значительных потенциальных возможностей, позволяющих быстро перестраиваться под действием биотических и абиотических факторов, приводящих к изменению тех или иных свойств микроба. Это определяет необходимость дальнейшего изучения биологических и генетических особенностей возбудителя сибирской язвы. Обнаружение и сравнительное изучение фенотипических свойств и молекулярной организации типичных и измененных форм изолятов поможет лучше понять процессы и механизмы изменения возбудителя и самой болезни, позволит установить эволюционные взаимосвязи патогена, прояснить эпизоотоологическую картину его распространения и оптимизировать систему мероприятий по защите животных от этой опасной болезни. Цель и задачи исследования. Целью исследований явилось изучение особенностей эпизоотологии сибирской язвы сельскохозяйственных животных в различных природно-географических областях Алтайского края с 1960 по 2001 гг., характеристики вирулентных и авирулентных изолятов её возбудителя, и выявление внутривидовых различий с использованием традиционных и дополнительных методов исследований фенотипических признаков и генетических особенностей. Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи: - анализ эколого-эпизоотологических предпосылок возникновения сибирской язвы в Алтайском крае; 8 - эпизоотологическое исследование по сибирской язве сельскохозяйственных животных в различных природно-географических областях Алтайского края за 1960-2001 гг.; - составить кадастр неблагополучных пунктов по сибирской язве животных Алтайского края (1927-2001 гг.); - анализ эпизоотолого-эпидемиологических аспектов сибирской язвы в Алтайском крае; - определить фенотипические свойства капсулообразующих и бес-капсульных полевых изолятов возбудителя сибирской язвы, выделенных в различных природно-географических областях Алтайского края; - определить наличие нуклеотидных последовательностей генов капсуло- и токсинообразования методом ПЦР у полевых изолятов В. anthracis и генетические различия между ними методом RAPD-фингерпринта. Научная новизна работы. В условиях Алтайского края изучена эпизоотическая ситуация по сибирской язве у разных видов сельскохозяйственных животных за 40-летний период и определено влияние природно-географических факторов на её развитие и течение; проведён анализ эпизо-отолого-эпидемиологической ситуации по сибирской язве; впервые в Алтайском крае составлен кадастр неблагополучных пунктов по сибирской язве животных (1927-2001 гг.); определены внутривидовые различия у полевых изолятов В. anthracis, выделенных на территории Алтайского края. Практическая значимость работы. Кадастр неблагополучных пунктов по сибирской язве животных Алтайского края (1927-2001 гг.) рассмотрен, одобрен и рекомендован к внедрению научно-техническим советом Управления администрации Алтайского края (протокол №3 от 25.02.2004 г.) и подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины СО РАСХН (протокол №12 от 27.05.2004 г.). 9 Комплекс методов оценки проявления фенотипических признаков и генетических свойств предложен в качестве дополнения к методическим указаниям «Лабораторная диагностика сибирской язвы у животных и людей, обнаружение возбудителя в сырье животного происхождения и объектах внешней среды». Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту: - анализ эколого-эпизоотологических предпосылок возникновения сибирской язвы и эпизоотической ситуации по сибирской язве у разных видов сельскохозяйственных животных в различных природно-географических областях Алтайского края за 1927-2001 гг.; - материалы кадастра неблагополучных пунктов по сибирской язве животных Алтайского края; - использование комплекса дополнительных фенотипических характеристик и изучение геномного полиморфизма методом RAPD-fingerprinting позволяющие выявлять внутривидовые различия у изолятов B.anthracis. Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на международной научно-практической конференции, посвященной 45-летию ВНИИВВиМ «Ветеринарные и медицинские аспекты зооанропонозов» (г. Покров, 2003); всероссийской научно-практической конференции «Генодиагностика инфекционных заболеваний» (г. Москва, 2003); региональной научной конференции, посвященной 60-летию АГАУ «Актуальные вопросы ветеринарной медицины и их решение в современных условиях» (г. Барнаул, 2003); I научно-практической конференции молодых учёных «Вопросы пантового оленеводства и болезней сельскохозяйственных животных» (г. Барнаул, 2003); V городской научно-практической конференции молодых учёных «Молодёжь - Барнаулу» (г. Барнаул, 2003); международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию профессора В.Я. Суе-тина «Актуальные аспекты экологической, сравнительно-видовой, возрас- 10 тной и экспериментальной морфологии» (Улан-Удэ, 2004); международной научно-практической конференции / ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии «Болезни диких животных» (Покров, 2004); международной научно-практической конференции «Региональные аспекты обеспечения социальной безопасности населения юга Западной Сибири - проблемы снижения рисков и смягчения последствий чрезвычайных ситуаций природного и техногенного характера» (Барнаул, 2004); сибирской научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (г. Новосибирск, 2004); научно-производственной конференции, посвященной 100-летию профессора Н.Г. Кондюрина «Актуальные вопросы микробиологии и инфекционной патологии животных» (г. Омск, 2004). Публикации. По материалам диссертации опубликовано 15 научных работ. Личный вклад. Представленные в диссертационной работе экспериментальные исследования, теоретический и практический анализ полученных результатов проведены автором самостоятельно. В'выполнении работы по разделам 3.8 и 3.9 оказали практическую и консультативную помощь сотрудники ГНУ ВНИИВВиМ: заведующий лабораторией «Биофизики» д.б.н. Цыбанов С.Ж. и младший научный сотрудник лаборатории «Экспериментальной микробиологии» Егорова И.Ю., которым автор выражает искреннюю признательность. Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 152 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение полученных результатов, выводы и приложения. Диссертация иллюстрирована 38 рисунками и 12 таблицами. Список литературы содержит 200 источников, в т.ч. 53 зарубежных авторов. Исследования по диссертационной работе выполнены в 2000-2005 гг. в Институте ветеринарной медицины Алтайского государственного аграрного университета и ГНУ ВНИИВВиМ. 11 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Фенотипические и генетические свойства В. anthracis и их изменчивость Возбудитель сибирской язвы — Bacillus anthracis, относится к порядку Eubacteriales, семейству Bacillaceae, роду и подроду Bacillus (Хоулт Д. и др., 1997). В настоящее время род Bacillus представлен 60 видами бацилл, близких по гено-фенотипическим свойствам. Наряду с типичными представителями вида, существует множество атипичных форм, отличающихся по фено-типическим и генетическим признакам (Гинсбург Н.Н. и др., 1975; Ерёменко Е.И., 1997; Онищенко Г.Г. и др., 1999; Бакулов И.А. и др., 2001). Основным этапом при выделении возбудителя сибирской язвы является оценка его культурально-морфологических свойств. В зависимости от условий его существования он может находиться в трёх различных морфологических формах: вегетативной капсульной (в организме животного или на специальных питательных средах), вегетативной бескапсульной (на обычных питательных средах), споровой (во внешней среде и при особых условиях культивирования на питательных средах) (Гинсбург Н.Н. и др., 1975). В вегетативной форме В. anthracis - неподвижная, грамположитель-ная, спорообразующая палочка длиной 5-10 мкм и толщиной 1-1,5 мкм. В препарате «висячая капля» она имеет хорошо выраженные закруглённые концы. В мазке, окрашенном по Граму, обращенные друг к другу концы палочек обрублены, а свободные нередко закруглены. Бациллы располагаются одиночно, но чаще всего в виде цепочек, состоящих из двух или нескольких члеников, длинные цепи служат признаком дегенерации культуры (Шляхов Э.Н., Груз Е.В., 1967; Коротич А.С. и др., 1976). Иногда обнаруживаются короткие, вздутые, толстые или более длинные тонкие палочки с закругленными концами, кокковидной или нитевидной формы. Описаны также цепочки палочек в 5-10 раз больше обычных разме- 12 ров, изогнутые, спиралеобразной формы и с расширениями на концах (So- bernheim G., 1931; Тетерник Д.М., 1940; Коронный А.В., 1942; Колесов С.Г., 1976; Бусол В.А. и др., 1990). Атипичные палочки особенно часто находили при исследовании мазков-отпечатков органов свиней, инфицированных возбудителем сибирской язвы (Тетерник Д.М., 1940; Андроников В.А., 1974; Колесов С.Г., 1976; Хватцева С.С., 1978; Ипатенко Н.Г. и др., 1983; Ипатенко Н.Г. и др., 1987). А.С.Невский (1953), Н.Г. Ипатенко (1979) и другие авторы выделили из организма свиней и описали штаммы В. anthracis, которые обладали ярко выраженной подвижностью (Tomcsik J., 1950; Brown E.R., Cherry W.B., 1955; Sterne M, Proom R, 1957; Кузьмин В.В., 1961). У В. anthracis установлено наличие L-форм, размножение которых происходит либо путем простого деления, либо путем почкования (Колчанов Л.А., 1987). Отличительной особенностью возбудителя сибирской язвы является способность образовывать капсулу, которая определяет степень их вирулентности. При окраске по Ребигеру цепочки капсульных палочек имеют вид бамбуковой трости, обрубленные концы клеток несколько вдавлены и в местах сочленения симметрично утолщены, бациллы тёмно-фиолетового, а капсулы фиолетово-розового цвета (Шляхов Э.Н. и др., 1975). При проведении бактериологического анализа необходимо учитывать наличие в природе бескапсульных штаммов, которые по другим признакам могут быть отнесены к возбудителю сибирской язвы. Так, при выделении из почвы 31 культуры только 19,4% обладали капсулообразующей способностью, кроме того, у 65% культур капсулу образовывали лишь отдельные клетки (Черкасский Б.Л. и др., 1978; Юзвик Л.Н., 1983). Из 57 культур, выделенных от свиней, 30 обладали четко выраженной способностью образовывать капсулу при выращивании на бикарбонатном агаре, а у остальных эта способность отсутствовала (Маринин Л.И. и др., 1999). Описаны случаи, когда бактерии выделяли капсульное слизистое вещество в среду выращивания, но не образовывали капсулу вокруг клетки. У некоторых сибиреязвен- 13 ных штаммов наблюдали образование капсулы не по всей поверхности клетки, а только в отдельных ее участках (Шляхов Э.Н. и др., 1975). Споры В. anthracis овальной формы и имеют размеры 1,2-1,5 мкм в длину и 0,8-1,0 мкм в поперечнике. В отличие от других спорообразующих микроорганизмов диаметр спор представителей рода Bacillus не превышает диаметра самой палочки. Расположение спор, как правило, центральное или субтерминальное. Отсутствие у спор ферментативной активности, низкое содержание воды, наличие плотной многослойной оболочки, а также повышенное, по сравнению с вегетативными формами, содержание кальциевой соли дипиколиновой кислоты обусловливают высокую устойчивость спор к воздействию различных физико-химических факторов (Шахбанов А.А., 1975). Имеются сообщения о возможности существования сибиреязвенных культур с измененной способностью образовывать споры, вплоть до полной ее утраты (Sobernheim G., 1931; StamatinN., 1960). В. anthracis является факультативным анаэробом, размножающимся как в отсутствии, так и в присутствии свободного кислорода, но в анаэробных условиях размножение протекает намного интенсивнее. Сибиреязвенный микроб неприхотлив к питательным средам, содержащим аминокислоты, как животного, так и растительного происхождения (мясо-пептонный бульон, мясо-пептонный агар, агар и бульон Хоттингера, желатина, молоко, среды из триптических и кислотных гидролизатов мяса, рыбной муки и казеина с добавлением дрожжевого и кукурузного экстракта и др.) и при оптимальном значении рН (7,2-7,6) обладает характерным ростом (Бургасов П.Н. и др., 1984). В большинстве случаев на агаре возбудитель сибирской язвы растёт в виде колоний типичной R-формы (крупные, серовато-матовые, шероховатые, с плоской или слегка выпуклой поверхностью, ворсистой бахромчатой периферией колонии). Однако анализ результатов изучения культур, выделенных из макроорганизма, почвы и сибиреязвенных штаммов из больших коллекций показал, что культуральные свойства могут иметь существенные разли- 14 чия. Так, в литературе описаны атипичные S-формы гладких колоний, переходные О-формы, а также RRS, RMS, G, Sm, Rp, и Sp-варианты сибиреязвенного микроба (Тетерник Д.М., 1940; Sobernheim G., 1941; Невский А.С., 1953; Соркин Ю.И., 1971; Бакулов И.А. и др., 1997). Роста В. anthracis на жидких питательных средах отличается единообразием. К концу первых суток инкубирования на дне пробирки отмечается характерный рост в виде сеточки, нитей или хлопка (комка ваты), бульон, остаётся прозрачным или слегка опалесцирует. В то же время в 2-5% случаев у заведомо сибиреязвенных культур встречаются отклонения от типичного роста в бульоне (Кузьмин В.В. и др., 1961; Берёзкина Г.П., 1978; Керимова Д.Д., 1978; Ипатенко Н.Г., Антонюк В.П., 1983). Так у некоторых слабовирулентных, вакцинных бескапсульных штаммов, а также у культур штаммов второй вакцины Ценковского через двое и более суток с момента посева наблюдается образование рыхлого пристеночного кольца по мениску бульона, которое при лёгком встряхивании пробирки разбивается на мелкие хлопья и оседает. Возможно равномерное помутнение бульона (Маринин Л.И. и др., 1999). В столбике 10-12%-ной желатины при посеве уколом В. anthracis на 2-5-е сутки образует желтовато-белый стержень, от которого под прямым углом отходят нежные боковые отростки - более длинные по мере приближения к поверхности среды (лучшие условия аэрации) и значительно укорачивающиеся в направлении к низу (Ипатенко Н.Г., 1979). Важным показателем при идентификации сибиреязвенного микроба является его чувствительность к антибиотикам, особенно к пенициллину (Шляхов Э.Н., Груз Е.В., 1963; Буравцева Н.П., Кулешова Л.И., 1971; Проскурина В.А. и др., 1992). На этом свойстве основан тест «жемчужного ожерелья» (Jensen J., Kleemeyer H., 1953; Коляков Я.Е., Мелихов А.Д., 1960; Seidel G., 1963). На среде, содержащей незначительные концентрации пенициллина, клетки возбудителя сибирской язвы распадаются на отдельные шаровидные образования (сферопласты), которые, соединяясь в виде цепочек, 15 дают характерную картину ожерелья из жемчуга или бус. При этом следует иметь в виду возможность появления среди вирулентных изолятов пеницил-лино-, стрептомицино- и рифампицинорезистентных вариантов (Ivanovics G., Foldes J., 1958; Груз Е.В., 1965; Nestor J., 1966; Stamatin N. et al., 1966; Кузнецова Л.И. и др., 1969; Соркин Ю.И., 1971; Шляхов Э.Н. и др., 1975; Проскурина В.А. и др., 1987). Выделенные культуры В. anthracis обладают лизабельностью к специфическому бактериофагу, независимо от их вирулентности (Brown E.R., Cherry W.B., 1955; Шляхов Э.Н., Груз Е.В., 1967; Шляхов Э.Н. и др., 1975; Коротич А.С., Погребняк Л.И., 1976; Керимова Д.Д., 1978; Черкасский Б.Л. и др., 1978). Лизису подвержены и антибиотикоустойчивые варианты, которые не дают феномена «жемчужного ожерелья» (Земцова И.Н., 1965). Однако Н.В. Обносова и В.П. Шуляк (1978) отметили отсутствие фаголизиса у трех штаммов из 33 выделенных из почвы и патологического материала от людей, хотя эти три штамма проявляли наибольшую вирулентность для мышей. В биохимическом отношении бацилла антракса достаточно активна, что выражается в способности продуцировать ряд ферментов: липазу, диастазу, протеазу, желатиназу, дегидразу, цитохромоксидазу, пероксидазу, ка-талазу, аргиназу и др. Микроб разлагает с образованием кислоты без газа глюкозу, сахарозу, мальтозу, сорбит, трегалозу, фруктозу, крахмал, инулин, маннит; медленно восстанавливает метиленовый синий, коагулирует растворы желтка куриного яйца и разжижает желатину; синтезирует лецитиназу (Хоулт Д. и др., 1997). Не вырабатывает или вырабатывает в незначительных количествах пенициллиназу и фосфатазу (Бургасов П.Н. и др., 1970; Шляхов Э.Н. и др., 1975; Коротич А.С., Погребняк Л.И., 1976; Колесов С.Г. и др., 1976). Культуры штаммов В. anthracis могут обладать разным уровнем про-теолитической активности. Протеолиз у вирулентных культур чаще более активный, чем у слабовирулентных, у которых более выражены сахаролитиче-ские свойства (Рево М.В. и др., 1958). Однако, О.Т. Лесняк (1970) отмечал, 16 что некоторые вакцинные штаммы обладали высокой протеолитической активностью. О.В. Шевченко (1999) установлено наличие у возбудителя сибиреязвенной инфекции трех типов протеаз: кальций- и цинкзависимые метал-лопротеазы и неметаллопротеазы (EDTA-зависимые). Длительное время считалось, что сибиреязвенный микроб не обладает гемолитической, лецитиназной и фосфатазной активностями (Коротич А.С. и др., 1976; Бургасов П.Н. и др., 1984), хотя в литературе встречались единичные публикации о выявлении данных свойств у отдельных изолятов (Trbic B.V. et al., 1953; Seidel G. et al., 1956). Это, по-видимому, связано с низкой чувствительностью используемых методов. В то же время, работами О.И. Цыганковой (1993) и О.В. Шевченко (1999) было показано, что при использовании более чувствительных тест-систем гемолитическую активность можно выявить у значительного числа штаммов сибиреязвенного микроба. Сибиреязвенные штаммы с одинаковыми культурально-морфологическими и серологическими свойствами могут обладать различной вирулентностью для лабораторных животных. Наиболее часто величину LD5o определяют при заражении белых мышей (Leise J.M. et al., 1959; Груз Е.В., 1965; Салтыков Р.А. и др., 1971; Шляхов. Э.Н., Груз Е.В., 1978). Для сравнения близких по вирулентности штаммов (по величине LD50) предложено использовать методы определения среднего времени гибели — СВГ, дающие достоверную оценку вирулентности различных штаммов (Fernelus A.L. et al., 1960; Little S.F. et al., 1986). Так, среднее время гибели белых мышей при заражении отдельными вирулентными штаммами составляло от 12 до 24 часов, в то время как при заражении некоторыми штаммами гибель животных наступала на 7-10 сутки. Штаммы, выделенные от свиней, вызывали гибель мышей на 10-18 сутки и позже (Ипатенко Н.Г. и др., 1987). Иногда выделенная культура является слабовирулентной или совсем не вирулентной для белых мышей (Лебединская И.С. и др., 1978). Помимо этого, по вирулентности в условиях заражения разных видов животных, возможно, проводить дифференциацию штаммов В. anthracis. Вирулентность штаммов сибиреязвенного 17 микроба предложено оценивать не только in vivo, но и in vitro. Сопоставлением результатов определения LD5o и LDioo с продукцией капсулы и токсина на питательных средах - СОПЭК (среда для сочетанного определения продукции экзотоксина и капсулы) было выделено пять групп штаммов: высоко-, умеренно- и слабовирулентные, авирулентные и апатогенные (Еременко Е.И., 1997). На современном уровне развития методологии изучения фенотипиче-ских признаков для исследования доступно лишь 10-20% от закодированных в геноме, поэтому сведения, получаемые при исследовании ДНК, гораздо более информативны, чем весь комплекс изучаемых фенотипических признаков. Кроме того, выражение определенных фенотипических признаков конкретизируется в каждом частном случае условиями внешней среды, тогда как генотип в меньшей степени подвержен действию внешних условий и, соответственно, признаки, характеризующие ДНК являются более стабильными (Антонов А.С., 1974; Блохина И.Н. и др., 1990). Основным генетическим элементом бактериальной клетки, несущим генетическую информацию о структуре белков, инициирующих и терминирующих кодонах, регуляторных участках, которые контролируют экспрессию генов и репликацию является хромосома (Брода П., 1982; Friedlander A.M. et al., 1989). Хромосомная ДНК — наиболее консервативная информационная структура, ответственная за физиологию бактерий, которая несет общие черты родовой характеристики (Анисимов П.И. и др., 1993). При детальном изучении генома возбудителя сибирской язвы была установлена его достаточно высокая внутривидовая гомогенность по содержанию Г+Ц, которое составляет 33,2 mol % (Dieter С. et al., 1989). У многих видов бактерий имеются генетические элементы, существующие в клетке независимо - бактериальные плазмиды, суперскрученные ковалентно-замкнутые кольцевые экстрахромосомные молекулы ДНК (Green B.D. et al., 1985; Пехов А., 1986), определяющие многочисленные фенотипи-ческие характеристики своего хозяина, включая патогенные и иммуногенные

Список литературы

Цена, в рублях: (при оплате в другой валюте, пересчет по курсу центрального банка на день оплаты)	1425

Скачать бесплатно	24396.doc

Найти готовую работу

ЗАКАЗАТЬ

Обратная связь:

Связаться

Вход для партнеров

Регистрация

Восстановить доступ

Материал для курсовых и дипломных работ

29.04.24 Результаты оценки психологических детерминант гражданской идентичности учащихся старших классов

29.04.24 Программа формирования гражданской идентичности старшеклассников

29.04.24 Психологические основания для разработки программы формирования гражданской идентичности старшеклассников

Архив материала для курсовых и дипломных работ

Ссылки:

Счетчики:

Быстрый переход к готовым работам

Мнение посетителей:

Найти готовую работу

Обратная связь:

Вход для партнеров

© 2006-2022. Все права защищены. Выполнение уникальных качественных работ - от эссе и реферата до диссертации. Заказ готовых, сдававшихся ранее работ.

© 2006-2022. Все права защищены.
Выполнение уникальных качественных работ - от эссе и реферата до диссертации. Заказ готовых, сдававшихся ранее работ.